核心提示：
厭氧菌（anaerobicbacteria）是一類在無氧條件下比在有氧環境中生長好的細菌，而不能在空氣（18%氧氣）和（或）10％二氧化碳濃度厭氧培養箱下的固體培養基表面生長的細菌。這類細菌缺乏完整的代謝酶體系，其能量代謝以無氧發酵的方式進行。厭氧菌是人體正常菌群的組成部分，廣泛存在于人體皮膚和腔道的深部黏膜表面，在組織缺血、壞死，或者需氧菌感染的情況下，導致局部組織的氧濃度降低，才發生厭氧菌感染。
一、厭氧菌標本的送檢方法與處理
標本送到實驗室后，應在20～30min內處理完畢，遲不超過2h，以防止標本中兼性厭氧菌過度繁殖而抑制厭氧菌的生長。如不能及時接種，可將標本置室溫保存（一般認為，冷藏對某些厭氧菌有害，而且在低溫時氧的溶解度較高）。
1）針筒運送：一般用無菌針筒抽取標本后，排盡空氣，針頭插入無菌橡皮塞，以隔絕空氣，立即送檢。這種方法多用于液體標本的運送，如血液、膿液、胸腹水、關節液等醫.學教育網搜集整理。
2）無菌小瓶運送：一般采用無菌的青霉素小瓶，瓶內加一定量的培養基和少量氧化還原指示劑，用橡皮蓋加鋁蓋固定密封，排除瓶內空氣，充以C02氣體。同時先觀察瓶內氧化還原指示劑的顏色，以判斷瓶內是否為無氧環境，如合格將用*將液體標本注入瓶中即可。
3）棉拭子運送：一般不采用棉拭子運送，如果使用該方法，一定使用特制運送培養基，確保無氧環境，確保不被污染，確保快速送檢。
4）厭氧罐或厭氧袋運送：將厭氧罐或厭氧袋內裝入可有效消耗氧氣的物質，確保無氧環境。該方法一般用于運送較大的組織塊或床邊接種的培養皿等。
二、厭氧菌的分離培養
厭氧菌的分離培養主要分初代培養和次代培養兩個階段，其中初代培養相對比較困難，關鍵的問題就是厭氧環境和培養基的選擇。初代培養的一般原則是：
1）先將標本涂片染色直接鏡檢，指導培養基的選擇。
2）盡量選用在厭氧菌中覆蓋面寬的非選擇性培養基。
3）多選1～2種覆蓋面不同的選擇性培養基。
4）盡量保證培養基新鮮。
5）要考慮到微需氧菌存在的可能。
1.選用適當的培養基接種：應接種固體和液體兩種培養基；
（1）培養基的使用，應注意下列各點：
1）盡量使用新鮮培養基，2～4h內用完；
2）應使用預還原培養基，預還原24～48h更好；
3）可采用預還原滅菌法制作的培養基（用前于培養基中加入還原劑，如L-半胱氨酸、硫乙醇酸鈉、維生素C及葡萄糖等，盡可能使預還原劑處于還原狀態）；
4）液體培養基應煮沸10min，以驅除溶解氧，并迅速冷卻，立即接種；
5）培養厭氧菌的培養基均應營養豐富，并加有還原劑與生長因子（血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等）。
（2）培養基的選擇：初次培養一般都使用選擇培養基和非選擇培養基。
1）非選擇培養基：本培養基使分離的厭氧菌不被抑制，幾乎能培養出所有的厭氧菌。常使用心腦浸液瓊脂（BHI）、布氏瓊脂（BR）、胰豆胨肝粉瓊脂（GAM）、胰胨酵母瓊脂（EG）、CDC厭氧血瓊脂等。
2）選擇培養基：為有目的選擇常見厭氧菌株，以便盡快確定厭氧的種類。
2.每份標本至少接種3個血平板，分別置于有氧，無氧及5%～10à2環境中培養，以便正確地培養出病原菌，從而判斷其為需氧菌、兼性厭氧菌、微需氧菌或厭氧菌中的哪一類。
3.厭氧培養法
（1）厭氧罐培養法。
（2）氣袋法。
（3）氣體噴射法：又稱轉管法。
（4）厭氧培養箱培養法：是迄今厭氧菌培養的好儀器之一。
（5）其他培養法：平板焦性沒食子酸法；生物耗氧法；高層瓊脂培養法。
4.厭氧狀態的指示：美藍和刃天青。無氧時均呈白色，有氧時美藍呈藍色，刃天青呈粉紅色。
5.分離培養厭氧菌失敗的原因：
①培養前未直接涂片和染色鏡檢；
②標本在空氣中放置太久或接種的操作時間過長；
③未用新鮮配制的培養基；
④未用選擇培養基；
⑤培養基未加必要的補充物質；
⑥初代培養應用了硫乙醇酸鈉作為厭氧菌培養基；
⑦無合適的厭氧罐或厭氧裝置漏氣；
⑧催化劑失活；
⑨培養時間不足；
⑩厭氧菌的鑒定材料有問題。
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