國家標準中,利用總大腸菌群作為糞便污染的指標。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的,在生化培養箱37℃生長時能使乳糖發酵,在24h內產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數的含量,表明水被糞便污染的程度,而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。
國家標準提供了多管發酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。
多管發酵法檢測總大腸菌群,分為三步:初發酵試驗,平板分離,復發酵證實試驗。初發酵試驗,采用乳糖蛋白胨培養液37℃的生化培養箱中培養24h,觀察產酸產氣情況。對陽性管培養物,接種于品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基,觀察菌落特征,并進行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落,接種于乳糖蛋白胨培養液,進行復發酵證實試驗,并根據標準所附檢數表報告結果。
其中,對生活飲用水,初發酵試驗接種水樣總量300ml,即100ml接種2管,10ml接種10管,采用兩個稀釋度,12支發酵管。對水源水,初發酵試驗接種水樣總量55.5ml,即10ml接種5管,1ml接種5管,0.1ml接種10管,共采用三個稀釋度,15支發酵管。兩種接種方法,所用的檢數表是不同的。
濾膜法檢測總大腸菌群,就是利用微孔濾膜,過濾一定量水樣,將水樣中含有的細菌截留在濾膜上,然后將濾膜帖放在選擇性培養基上(如品紅亞硫酸鈉培養基),經培養和證實試驗后,直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落,并計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。
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