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　　一、實驗目的
 

　　掌握利用種子作為外植體進行快速繁殖的方法；掌握試管花卉的培養技術；了解植物開花的影響因素。
 

　　二、實驗原理
 

　　試管開花是指用組織培養的方法，使植物開花的過程在培養容器中完成。一般情況下，植物必須達到某種成熟階段時才能開花。自1946年羅士韋在對菟絲子莖尖培養時發現了花器官的形成后，植物組織培養技術已用于植物離體開花的研究。影響試管開花的因素主要有外植體，外源植物激素，營養水平和環境因素等4個方面。通過改變培養基中外源植物激素、營養水平和培養環境條件，可以誘導培養物在試管內開花。
 

　　試管花卉作為高新技術與工藝生產相結合的新生物, 不僅在理論研究上有重要作用, 而且可以利用成花決定因素的研究來培養能迅速進入生殖階段的試管苗或有觀賞價值的試管花卉, 并將這一技術直接應用于花卉生產。試管花卉有較大市場前景,
 

　　目前可以做成試管花卉的植物有石斛蘭、龍角、波露、短葉蘆薈、美麗十二卷、雞冠花、玫瑰、紅蓮、鳳梨、大花蕙蘭、狼牙掌、燕尾蘆薈、非洲紫羅蘭、下城蘆薈、金線蓮、迎春、六月雪、紅葉李、無刺火棘、紫薇、情人草、康乃馨、幸運草、草莓、非洲菊、文心蘭等。
 

　　三、實驗器具與藥品
 

　　①器材：電子天平、托盤天平、燒杯(50ml, 100ml, 500ml, 1000ml)、量筒(1000ml,100ml, 25ml)、容量瓶(1000ml,500ml,100ml)、藥勺、稱量紙、玻璃棒、滴管、電爐、冰箱、人工氣候箱、移液槍、pH計、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、鑷子、酒精燈、棉球、三角瓶、培養皿。
 

　　②試劑：MS培養基各種母液、PP333、KT、6-BA、NAA、IAA、蔗糖、瓊脂、酒精、HgCl2。
 

　　③以矮生雞冠花品系的種子為試材。
 

　　四、實驗內容與操作步驟
 

　　1、培養基的配制
 

　　①種子萌發培養基：MS基本培養基
 

　　②增殖培養基：MS+NAA 0.1mg·L-1+6-BA 1.0mg·L-1+ 蔗糖20 g·L-1+ 瓊脂10 g·L-1
 

　　③試管開花誘導培養基：MS+ PP333 0.5mg·L-1+NAA 0.01mg·L-1+ 蔗糖20 g·L-1+ 瓊脂10g·L-1
 

　　2、種子滅菌
 

　　先用洗潔精洗凈種子， 用自來水流水沖洗干凈；再用0.1% HgCl2浸泡10 min，后用無菌水反復沖洗5 遍。在超凈工作臺上將滅菌后的種子接種到MS 培養基上，每三角瓶接種5-10個外植體。人工氣候箱條件為：光照12h·d-1、光照強度1500Lx、溫度25～26℃。14d 后統計種子發芽率和污染率。
 

　　3、增殖培養
 

　　當無菌苗長到約2cm 時，取其中約1cm 芽段， 接種到②增殖培養基上，培養26 d 后統計其增殖倍數。
 

　　4、開花誘導
 

　　將高約2～3cm的試管苗，轉到③試管開花誘導培養基中，人工氣候箱條件：日溫(25±2)℃，夜溫(20±2)℃，光照強度1500～3000lx，光照時間12h/d，接種30d后觀察統計試管內開花情況。
 

　　五、實驗結果
 

　　觀察試驗結果，報告種子發芽率和污染率、增殖倍數和試管開花情況。