全自動固相萃取儀的使用步驟
1.選擇小柱或濾膜
小柱或濾膜的大小與規格應視樣品中待測物的濃度大小而定。對于濃度較低的體內樣品, 一般應選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品。
2.活化
萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml 溶劑沖洗濾膜使填料保持濕潤, 因為填料干燥會降低樣品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也會影響回收率的重現性。
3.上樣
一般可采取以下四種方法:
(1) 用0.1mol/L 酸或堿調節, 使pH<3或pH>9, 離心取上層液萃取;
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質后取上清液, 以水或緩沖液稀釋后萃取;
(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質后取上清液, 調節pH 值后萃取;
(4)超聲15min后加入水、緩沖液, 取上清液萃取。流速應控制為1ml/min, 流速快不利于待測物與固定相結合。
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