ERM-AD442k LAMBDA DNA材料ERM-AD442k包含基因組DNA,置于1 mmol/L Tris(羥甲基)氨基甲烷(TRIS)和0.01 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)的緩沖液中,pH為8.0。每個小瓶中含有約1.1 mL的溶液。對ERM-AD442k的純度進行了研究,得出結(jié)論,ERM-AD442k只含有少量的大腸桿菌DNA。采用紫外分光光度法計算DNA質(zhì)量濃度,對變性DNA的吸收系數(shù)為37ng/µL。用dPCR計算DNA拷貝數(shù)濃度。
使用說明
ERM-AD442k 需要仔細的重復(fù)倒置或混合,以確保DNA的均質(zhì)溶液。以4°C的速度解凍小瓶中的內(nèi)容物過夜。將小瓶及其內(nèi)容物置至室溫,然后輕輕地將小瓶內(nèi)容物均質(zhì)10 min。這種均勻化過程需要再次重復(fù)。我們建議避免“侵入性"攪拌,以消除污染。也不建議上下移液,以避免DNA剪切力。建議ERM-AD442k的凍融次數(shù)不要超過5倍,以達到DNA質(zhì)量濃度的一致性。因此,強烈建議在第一次解凍后和*勻漿后再引用ERM-AD442k。這些小瓶應(yīng)在層流下打開和處理,以減少污染的風(fēng)險。
預(yù)期用途
該材料的主要用途是用作校準(zhǔn)劑。材料及其認證價值旨在用于校準(zhǔn)DNA量化方法如pico綠色®dsDNA分析工具包(生命技術(shù))或DNAQF量化工具包(西格瑪-奧爾德里奇),質(zhì)量控制和評估方法性能,即檢查分析結(jié)果的準(zhǔn)確性或校準(zhǔn),因為這個DNA校準(zhǔn)劑具有廣泛和通用的用途。作為任何參考材料,它也可以用于建立控制圖或驗證研究。與認證值相比,材料的指示值是指不確定性太大而不允許認證,因此不如認證值的可靠性。
儲存
ERM-AD442k LAMBDA DNA 材料應(yīng)在-20°C±5°C的黑暗中儲存。如果在生產(chǎn)過程中排除了微生物污染,那么溶液中的lambdaDNA可以用于大量的實驗。如認證報告所述,材料不應(yīng)超過5次凍融循環(huán),以避免DNA質(zhì)量濃度不一致。該材料也可以在4°C下保存4周,因為在此期間觀察到的經(jīng)認證的DNA質(zhì)量濃度的變化并不顯著。建議在使用后用原來的螺絲蓋關(guān)閉小瓶。溶液中的DNA不應(yīng)暴露在陽光直射或任何其他紫外線輻射下。然而,歐盟委員會不能對在客戶的辦公場所存放材料期間發(fā)生的變化負責(zé),特別是對打開的小瓶。
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