SCIEX TripleTOF 系統(tǒng)上的 SWATH 采集技術(shù)已快速成為復(fù)雜樣品分析物鑒定和定量分析所用的重要質(zhì)譜采集策略之一。SWATH 采集技術(shù)策略借助 SCIEX TripleTOF 和四極桿飛行時(shí)間 QTOF 技術(shù)的性能和速度實(shí)現(xiàn)。通過(guò)公正的數(shù)據(jù)采集策略提供試驗(yàn)所需的數(shù)據(jù)完整性,從而降低漏掉樣品中重要成分的風(fēng)險(xiǎn)。
SWATH 采集技術(shù)是一種非數(shù)據(jù)依賴(lài)型采集策略,可對(duì)樣品中所有可檢測(cè)到的化合物進(jìn)行檢測(cè)和定量分析 (MS/MSALL)。通過(guò)結(jié)合 SCIEX TripleTOF 和 QTOF 硬件才能實(shí)現(xiàn)的高靈敏度和高速 MS/MS 采集,可以碎裂樣品中所有可檢測(cè)的分析物。
SWATH 采集技術(shù)與數(shù)據(jù)依賴(lài)型采集技術(shù) (DDA)有何區(qū)別
數(shù)據(jù)依賴(lài)型采集技術(shù) (DDA):
在液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)分析過(guò)程中,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),將會(huì)有大量分析物從色譜柱洗脫出來(lái)并進(jìn)入質(zhì)譜儀中。數(shù)據(jù)依賴(lài)型采集技術(shù)會(huì)在較寬的 m/z 范圍內(nèi)收集 MS 光譜,檢測(cè)到的分析物峰按強(qiáng)度降序排序。然后,從列表頂部開(kāi)始觸發(fā)分析物的 MS/MS 采集。這一過(guò)程會(huì)在液相(LC)梯度上不斷重復(fù)進(jìn)行。這里會(huì)使用較窄的 Q1 隔離窗,僅發(fā)送相關(guān)分析物進(jìn)行 MS/MS 分析。但是,DDA 有一個(gè)重要局限:如果同時(shí)洗脫出大量分析物并且這些分析物的豐度差別很大,就非常可能遇到低含量分析物在原始 MS 譜圖中未能檢出,或者質(zhì)譜儀運(yùn)行超時(shí)(由于樣品過(guò)于復(fù)雜,運(yùn)行速度相對(duì)顯得過(guò)慢)的風(fēng)險(xiǎn),從而導(dǎo)致無(wú)法捕捉在 MS 模式下檢測(cè)的所有物質(zhì)的 MS/MS 譜圖。這會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)遺漏。
SWATH 采集技術(shù)(非數(shù)據(jù)依賴(lài)型采集技術(shù) (DIA)):
在 SWATH 采集技術(shù)中,質(zhì)譜儀不需要初始檢測(cè) MS 峰即可繼續(xù)進(jìn)行 MS/MS 分析。質(zhì)譜儀在整個(gè) m/z 質(zhì)量檢測(cè)范圍內(nèi)使用更寬的 Q1 隔離窗,從而可以收集通過(guò)每個(gè) Q1 窗的所有可檢測(cè)分析物的完整 MS/MS 譜圖。此方法在 LC 時(shí)間范圍(周期時(shí)間較短)內(nèi)查詢(xún)整個(gè)質(zhì)量范圍,確保您獲得樣品中可檢測(cè)的每個(gè)峰的完整 MS 和 MS/MS 圖。此技術(shù)可提供的數(shù)據(jù)完整性。
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