組織培養配方研制
組織培養配方的研制是組培技術的關鍵,但受材料,經驗等因素的影響,實際生產中配方研究的方法千差萬別,但總體來說還是有章可循的,簡單介紹一些常用方法,以供參考。1、配方的研制方向
1、去分化----誘導形成原球莖、愈傷組織、
2、再分化芽----原球莖形成植株、不定芽形成植株、胚狀體、珠莖、花芽、葉、鱗片母體組織直接產生小植株、無菌短枝扦插腋芽萌發
3、芽苗伸長---小苗拔高,成為幼苗。
4、再分化根--- 愈傷、莖部直接生根
激素一般配比規律Skoog和Miller等所提出的生長素和激動素比例決定根和芽分化的觀點,曾被大量的試驗結果所證明 。因此二者的濃度和比例非常重要,其合適的配比就是常說的配方。狹義的配方,如:MS +BA2+NAA0。2廣義的配方,如:B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+瓊脂6g1。去分化:生長素低;細胞分裂素高
2。再分化:細胞分裂素高;生長素低
3。莖伸長:赤霉素調節4。生根:生長素高;細胞分裂素低
1.參閱外來配方:簡單實用,節省時間,較為準確,效益突出。2.原配方的改造:如蘋果棗組培快繁
原分化培養基:MS+6 -BA4.0+NAA0.3
篩選分化培養基進行試驗:以原配方BA4.0、NAA0.3為參照,設計4次重復,兩兩組合,則有16種配方組合,從中篩選BA、NAA*組合。
6 -BA----2.0、3.0、4.0、6.0 mg/L
NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5 mg/L
3.新配方的研制3.1*設計(適合因素少,水平少的試驗)正交設計
正交試驗設計法----它是以概率它是以概率論數理統計論數理統計、專業技術知識和實踐經驗為基礎,充分利用標準化的正交表來安排試驗方案,并對試驗結果進行計算分析,zui終達到減少試驗次數,縮短試驗周期,迅速找到優化方案的一種科學計算方法。
我國從我國從20世紀世紀50年代開始,以*數學研究所為基礎深入研究這門科學,并應用到工農業生產中去,得到了廣泛推廣成績顯著。正交法之所以受到人們的關注正交法之所以受到人們的關注。
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