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第三期
溶解的空氣(氧)對檢測的影響
形成氣泡產生的影響較容易被理解，它往往使壓力波動，造成基線噪聲。然而，有時溶于溶劑的空氣并不形成氣泡，但其造成的影響依然是嚴重的，且不易被發現。
1.大量溶解的氧氣對檢測的影響
溶解于溶劑的氣體中，氧氣對檢測的影響大，而且是多方面的。即使在當時的溫度、壓力下，溶解于溶劑的量并不飽和，不足以形成氣泡，其影響還是相當嚴重的。
(I)熒光檢測：當使用熒光檢測器來測定萘、芘等多核芳香烴或維生素E等生育酚時，溶解于流動相中的氧，由于熒光猝滅而影響化合物熒光強度，干擾測定。此時，盡管基線稍有降低，峰高的降低則更為明顯。例如，當大量氧氣溶于流動相對；測得萘的熒光強度(峰面積)只有完全脫氣以后萘的峰面積的25%。
(II)電化學測定：特別是在還原電位下測定時，由于氧的濃度高，產生還原電流使信噪比變差。
2.大量或可變的溶解氧對紫外檢測的影響
在紫外區，氧本身就有吸收，使測得結果和基線都偏高，例如在210nm飽和有空氣的甲醇(氧的分壓 0.2大氣壓)在過氦脫氣以后，基線可降低0.32吸收單位(圖一)。
圖一：210nm測定時脫氣與否對基線的影響
由引可見，經過脫氣可大大降低紫外區的背景。另一方面，氧氣的存在不僅使基線變高，而且當氧氣的濃度隨著壓力、溫度等諸因素變化而變化時，將使基線波動十分嚴重。由上例可知，如果在滿標尺 0.01吸收單位測定時，氧的濃度變化1%，將引起基線相當于30%滿標尺的變化。此外，當使用含氧的甲醇等作梯度洗脫時，隨著流動相甲醇的含量增多而升高的基線，有可能影響進一步的數據處理(見圖二)
圖二：水-甲醇梯度洗脫時，脫氣與否對210nm處測定基線的影響，甲醇在30分鐘內由20-60%變化，然后維持5分鐘
溶解氧的影響在短波區較為明顯，但也與溶劑種類有關，例如溶解氧對 四 氫funan的影響一直延伸至254mm處，在254 mm處，溶解氧的影響由 四 氫funan ，甲醇、乙腈、水逐漸降低。就乙腈而言，即使在較短長區影響也不明顯。因此，同樣的氧氣濃度、對不同的溶劑其影響也不同，可見其吸收的增加并非完全由于自身的吸收，也許還與氧與溶劑雜質之間的某些反應有一定的關系。
進行紫外波外區高靈敏測定時，一般采用乙腈較好，如果為了提高分離效率，則一定要控制好溶解氧的量，換言之，必須采用適當的脫氣手段。
3.溶解空氣量的變化引起示差檢測時的基線漂移
折射率不僅與液體中固體或液體溶質的濃度有關，也與氣體溶質的濃度有關。因此，由于溫度變化而引起氣體溶解量的變化，將使折射率基線漂移波動。例如以 四 氫funan為溶劑，在滿標尺為8×10-6折射率單位的情況下測定時，溶劑中空氣的溶解量改變1%，則導致10%以上的基線變化。要抑制此種干擾，需使流動相處于恒溫，或用氦置換溶解的其它氣體，相對而言，氦的溶解度隨溫度的變化較小。
圖三：對示差檢測器基線的影響
綜上所述，即使未形成氣泡，溶解的空氣對測定還是有影響的。
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