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EIA5049 類胰島素生長因子結合蛋白3ELISA試劑盒

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類胰島素生長因子結合蛋白3ELISA試劑盒用于體外定量測定人血清中胰島素樣生長因子結合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。

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類胰島素生長因子結合蛋白3測定試劑盒(酶聯免疫吸附法)

ELISA操作加樣過程常見問題及解答

1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;

  1. 其他樣本的處理不當,導致加樣不準;
  2. 加樣時,不同標準品或樣本不更換槍頭;
    4)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);
    5)加樣尤其是加底物液和終止液時,順序不*,導致樣本顯色時間不*。
    解決辦法:
    1) 標本為血清:將血液先自然存放 1-2 小時后,再用 3000rmp 離心 15 分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合 5-10 次,放置一段時間后,3000rpm 離心 15 分鐘;若在幾天內檢測,可放在 2-8℃ 冰箱中,若要貯存,則置于-20℃ 的低溫冰箱內。

2) 若樣本不是常規樣本,應按照不同樣本的處理方法先行處理樣本,終使用清澈的樣本進行檢測;(詳見我公司常用樣本處理技術文章)
3)加樣時,不同的標準品,質控品和樣本分別使用不同的槍頭,避免交叉污染

加樣后及時放入孵箱;標本較多時,請分批操作;
5) 加酶或底物液,終止液時按照前后*的順序加樣,保證每個樣本反應的時間*。為了縮短反應時間,可采用多道移液器進行。

通用名稱:類胰島素生長因子結合蛋白3測定試劑盒(酶聯免疫吸附法)
英文名稱:IGFBP-3 ELISA

公司品牌:德國DRG
產品貨號:EIA5409
產品規格:96T
檢測樣本:血清
儲存條件:2-8℃
檢測方法:ELISA
預期用途:用于體外定量測定人血清中胰島素樣生長因子結合蛋白-3的含量
供應商家:深圳市科潤達生物工程有限公司


類胰島素生長因子結合蛋白3ELISA試劑盒產品規格
96T


類胰島素生長因子結合蛋白3ELISA試劑盒預期用途
      IGFBP-3 試劑盒用于體外定量測定人血清中胰島素樣生長因子結合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。
IGFBP-3 前言簡介
      胰島素樣生長因子(IGF)系統是正常體內生長和再生的主要調節因子,影響細胞增殖,分化和細胞凋亡。 此外,IGF-系統似乎改變胰島素敏感性和*性葡萄糖代謝。 后,許多流行病學,實驗和臨床資料表明,IGF-系統也涉及幾種常見癌癥的發展以及常見疾病如動脈粥樣硬化和2型糖尿病等。
     IGF家族由一系列密切相關的多肽組成,其包括兩個主要促進生長的多肽,IGF-I和IGF-II,6種特異性高親和力IGF結合蛋白(IGFBP-1至-6)和一個大的非IGF結合糖蛋白,“酸不穩定亞單位”(ALS)。
IGFBP-3是較豐富的IGF結合蛋白,占健康人循環IGF結合能力的75%以上。 IGFBP-3與IGFBP-5共享功能特性,因為兩種肽都能與ALS和IGF-I或-II的形成高分子量約150千道爾頓的三元復合物。 然而,IGFBP-5循環濃度比IGFBP-3低得多,而在健康受試者中,三元復合物攜帶多達90%的IGFBP-3但只有約50%的IGFBP-5。
     初IGFBP被認為是IGF-載體蛋白,穩定血漿IGF水平并控制IGF從循環中流出至血管外隔室。此外,人們認為 IGFBP復合IGF在生物學上或多或少無活性,被剝奪了與IGF-1受體相互作用的能力。但是,很快人們就發現,在一些實驗設置中,IGFBP激活而不是抑制IGF-I介導的作用,因此,IGFBP通常被稱為IGF-1生物活性的調節劑。另外,大多數的IGFBP,特別是IGFBP-3,發揮著IGF-I和IGF-I受體的獨立作用,可能涉及位于細胞表面和細胞內的特定受體間的相互作用。例如,IGFBP-3現在被認為是作為抗癌分子服務的,它可以明顯防止幾種常見的癌癥,同時IGFBP-3在培養的脂肪細胞中對胰島素信號的傳導作用也被提出。
     三元復合物的轉換非常緩慢,一天中IGFBP-3的血漿濃度始終保持穩定,而不受短期營養變化的影響。 因此,IGFBP-3的水平可以由一個單獨測  量確定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要調節因子,因此,三種多肽水平在青春期生*間增加,其后隨著年齡的增長逐漸下降。 在兒童中,IGFBP-3已顯示與24小時GH分泌相關,因此,IGFBP-3可能對兒童GH缺陷的診斷有幫助。



IGFBP-3 試劑盒檢測原理

        GFBP3-ELISA是固相酶擴增敏感性對微孔板進行的免疫測定。標準品和樣品與包被的捕獲單克隆抗體(MAb 1)和用辣根過氧化物酶(HRP)標記的單克隆抗體(MAb 2)反應。經過孵育形成一個三明治結構:包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP,洗滌微孔板以除去未結合的酶標記抗體。通過顯色測量結合的酶標記抗體反應。加入顯色溶液(TMB)并孵育。添加終止液終止反應,然后在適當波長下讀取微孔板。被測物含量的顯色程度與人IGFBP3濃度成正比。繪制標準曲線,樣品中IGFBP3濃度通過標準曲線可直接讀取。

IGFBP-3 試劑盒組成成分

 

 成分規格(96T)狀態

PLATE
96孔微量滴定板,包被了IGFBP3(單克隆抗體)96孔即用型

AbHRP  CONC
酶標記物濃縮液:HRP標記的抗IGFBP3(單抗),含procin和牛血清白蛋白的檸檬酸緩沖液0.5ml*1瓶用酶標記物緩沖液20倍稀釋

CONJ BUF
酶標記物緩沖液:含有牛血清白蛋白和百里酚的tris緩沖液10ml*1瓶即用型

CAL N
標準品-N=1-5,含牛血清和百里酚的磷酸鹽緩沖液。
瓶體標簽上有具體濃度。
標準品都是預稀釋過的,用稀釋液做0標準品。
5瓶凍干粉加入1ml蒸餾水

DIL BUF
稀釋液:含有牛血清,牛白蛋白和百里酚的磷酸鹽緩沖液100ml*1瓶即用型

ConTROL N
質控品N=1或2 ,含有人血清和百里酚,質控品是預稀釋過的2瓶凍干粉加入1ml蒸餾水

WASH SOLN
CONC
洗滌液(tris-HCL)10ml*1瓶蒸餾水200倍稀
釋(使用電磁攪拌器)

CHROM  TMB
底物液:TMB12ml*1瓶即用型
STOP SOLN終止液:1.0N鹽酸12ml*1瓶即用型


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