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60108-305 美國賽默飛熱電HyperSep C18 小柱

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使用 SPE 樣品制備技術可極大提高多種生物學、制藥、法醫學和環境應用的穩健性和可靠性。Thermo Scientific  HyperSep  C18 小柱的特點是擁有用于非極性至中度極性化合物的高保留率的烷基鍵合相。 該疏水反相填料可保留大多數非極性化合物和水性基質中的大多數有機分析物。

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.測定多肽,一般采用什么柱子?流動相是乙腈和水,還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,應該怎么選擇柱子?

答:分子量不高的多肽一般選用常規C18柱就能測定,也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。

 

5.氨基柱在進酸性樣品時,很傷柱子,如使用一段時間后,柱效降低,峰形改變,如何恢復?

答:氨基柱測酸性樣品,應該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化,導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。建議:用5~10倍的柱體積的含0.5~1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后,再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如,0.1%。

 

6.色譜柱的技術都有哪些?比如,封尾等,這些技術在應用時都體現在哪里?

答:色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。

國內和國外想比,我認為色譜柱的差距在于:國內公司以前都不會自己開發填料,一般買國外現成填料裝柱,買到的填料質量控制權不在自己手里。另外因為裝柱歷史短,經驗積累少,裝柱工藝也沒有*達到國外水平。另外,對色譜柱性能很關鍵的基礎材料——裸硅膠,國產的還不過關,在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產品相比,差距很大。

 

7.色譜柱技術的差距在哪里?

答:色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。

國內和國外想比,我認為色譜柱的差距在于:國內公司以前都不會自己開發填料,一般買國外現成填料裝柱,買到的填料質量控制權不在自己手里。另外,因為,裝柱歷史短,經驗積累少,裝柱工藝也沒有*達到國外水平。另外,對色譜柱性能很關鍵的基礎材料——裸硅膠,國產的還不過關,在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產品相比,差距很大。

 

8.柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢?原來也討論過這個問題,我也拆下來清洗過,但我看到柱前段的污染更甚,于是就用刀片刮了刮,然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了,但使用壽命會不會減少呢?

答:柱頭污染了,就取出污染的,再裝一些填料。因為,加入你刮了些填料,那么微觀的塔板數就少了。假入你刮得不多,僅表面,可能就是一些臟物,所以,問題解決,但是,今后還會有同樣問題,再掛,那么不小心刮,影響柱效。建議還是裝一個預柱。

 

9.如果柱子取下來放置一段時間,需要做什么保護嗎?

答:對一般的反相柱,也就是洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中,然后用堵頭塞緊柱兩頭,以免保存溶劑揮發,應該不需要做特殊的保護。

 

10.流動相中加入適量的si氫fu喃可以改善峰形的機理是什么?

答:《高效液相色譜方法及應用》于世林編著的上面說:甲醇為質子給予體、乙腈為質子接受體、si氫fu喃是偶極溶劑,應該除了極性影響,還有另外的影響因素,至于分離機理,還是比較復雜的,不能看成是個萬能方法。

 

11.關于色譜柱的填裝問題!我個人認為現在色譜柱的填裝一般有3種情況:

①國外生產填料并填裝完成成品賣到國內;

②國外生產填料,國內填裝銷售;

③國內生產填料,國內填裝銷售。

一般情況下,第1種情況賣的貴,也質量!可是我就不明白了:如果是填料的生產很復雜的話,那么填裝上國內也跟不上去嗎?為什么換在國內填裝就會出現或多或少的一些小問題呢?

答:國內填裝會出現質量小問題,和國內目前普遍做事沒有國外嚴謹有關吧。如果工藝技術上沒有問題,又能制訂并切實執行一整套嚴格的生產質量管理措施,國內填裝和國外填裝并無區別。


 

 

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