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操作室厭氧環境形成

1）按使用要求放置好必要的配件和器具、并向操作室內放入兩個五毒塑料袋。

2）混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調整，調節減壓閥，使輸入壓力為0.1Mpa

3)打開設備后配，電源開關后，按控制牌上的總電源鍵，使設備通電。

4）操作室放入1000g鈀粒（密封），由冷凝系統除濕，并放入厭氧指示劑。

5）關緊取樣室內外門，并抽真空校驗。（按控制面牌上真空泵鍵，按一下開，再按一下關）

6）操作室內*次置換（氮氣置換）：

（1）先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一個插入塑料袋。

（2）接通氮氣進氣路，打開操作室氮氣控制閥，使兩只塑料袋充足氮氣后，關閉電磁閥，然后扎緊袋口。

（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

（4）把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內，至全部防除。

7）操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次沖氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關閉排氣。

8）操作室第三次置換（混合氣體置換） (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%）

（1）調換氣路打開操作室混合氣閥進氣，沖氣時取樣室先抽真空，并注意隨時按排氣閥關閉排氣。

（2）混合氣充滿塑料袋后，關閉電磁閥，并打開混合氣限流閥，使混合氣經過穩流器、流量計、調整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。

（3）把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。

（4）通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態

9）操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，并在厭氧指示條反應區上滴一點潔凈水，1-2小時后，觀察其變色情況，反應部分深藍色變為淺藍為操作室內達到厭氧環境。

10）紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間自定。

菌種的置入和培養

1）檢查取樣室內門并關緊之。

2）打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外們。

3）取樣室充氮置換三次過程，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa)以上停，然后打開取樣室氧氣閥進氣，使指針回復零位，關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束。

4）如選定真空度較低就需要增加置換的次數。

5）取樣室外門開啟、關緊后，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗。

6）厭氧培養箱需要長期連續使用的條件

（1）每天在操作室內放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新換氣。

（2）要長期連續輸入微量的混合氣體。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。

（3）.連續培養運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內，干燥2－3小時可使其復原）

7）接種棒滅菌器的應用：

（1）隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）。

（2）熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。

8）操作室理的培養箱理的培養箱內的溫度可任意選擇和控制。