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食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法解決方案

來源:北京迪馬科技有限公司   2017年10月11日 09:36  

 

三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖,俗稱蔗糖素,由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學(xué)共同研制并于1976年申請的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點(diǎn),被認(rèn)為是目前zui的功能性甜味劑之一,代表了目前強(qiáng)力甜味劑研究的zui高水平。雖然科學(xué)家們經(jīng)過長期的毒理實(shí)驗(yàn)證明其具有較高的安全性,但也有三氯蔗糖可誘發(fā)偏頭疼發(fā)作的報(bào)道。

建立食品中三氯蔗糖的測定方法,可為食品生產(chǎn)企業(yè)提供生產(chǎn)性指導(dǎo),并為質(zhì)量監(jiān)督部門提供食品質(zhì)量監(jiān)管依據(jù)。我國國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。

方法優(yōu)勢:

迪馬科技在參考國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》基礎(chǔ)上,進(jìn)行了方法優(yōu)化,推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法,該方法:

  1. 采用固相萃取-液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖,使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品,通過HPLC-ELSD檢測;

  2. 前處理步驟簡單、凈化效果好、重現(xiàn)性好,定量限7.5 mg/kg,符合《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》對三氯蔗糖的*規(guī)定;

  3. 適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗(yàn)所、第三方檢測機(jī)構(gòu)、食品檢測機(jī)構(gòu)、大型食品生產(chǎn)商、高校和科研院所等。

以下為詳細(xì)解決方案,敬請參考!

食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法

1、適用范圍                                                                                       

本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂和果凍中三氯蔗糖的檢測,方法定量限7.5 mg/kg。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品,用水配制成10 mg/mL的儲備液,吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。

3、提取

3.1 含蛋白脂肪類液體:液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋

10 mL樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;

3.2 含蛋白脂肪類固體:餅干、奶酪和奶茶

5 g樣品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液,振蕩2 min,超聲提取5 min,6000 rpm離心5 min,取10 mL上清液,待凈化;

3.3 飲料:可樂(量取前超聲排氣泡)

10 mL樣品,加入10 mL 水,混勻,取10 mL,待凈化;

3.4 果凍

5 g樣品,加入5 mL 水,熱水超聲溶解,混勻,趁熱凈化。

注:《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的測定》中提取液為75%甲醇水溶液,減壓濃縮過程中暴沸嚴(yán)重,不易操作。

4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS(Cat.#:68012)

(1)活    化:

依次向柱中加入5 mL甲醇、5   mL水,棄去流出液;

(2)上    樣:

將待凈化液加入柱中,棄去流出液(控制流速不超過每秒1滴);

(3)淋    洗:

(4)洗    脫:

向柱中加入5 mL   20%甲醇水溶液,棄去流出液;

向柱中加入3 mL甲醇,收集流出液;

(5)定    容:

將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干,用流動相定容至1 mL,供HPLC分析。

5、色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99601)

流速:1.0 mL/min

進(jìn)樣量:20 μL

柱溫:35 ℃

檢測器:SEDEX LT-ELSD,溫度:40℃,壓力:3.5 bar,Gain:6

流動相:A:水;B:乙腈

梯度設(shè)置

時間/Min.

0

14

15

22

23

30

A(%)

89

89

10

10

89

89

B(%)

11

11

90

90

11

11

6、添加回收結(jié)果

食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結(jié)果

 

添加水平200 mg/kg

添加水平20 mg/kg

添加水平7.5 mg/kg

空白含量(μg/mL)

回收率(%)

加標(biāo)量

回收率(%)

加標(biāo)量

回收率(%)

加標(biāo)量

早餐奶

99.01

10 mg/mL 200 μL

109.82

1000 μg/mL

200 μL

96.52

1000 μg/mL

75 μL

巧克力奶

99.70

10 mg/mL 200 μL

100.91

1000 μg/mL

200 μL

95.88

1000 μg/mL

75 μL

咖啡奶

100.34

10 mg/mL 200 μL

112.34

1000 μg/mL

200 μL

126.00

1000 μg/mL

75 μL

養(yǎng)樂多

128.83

10 mg/mL 200 μL

130.8

酸奶

105.58

1000 μg/mL

200 μL

123.42

1000 μg/mL

75 μL

醬油

77.85

10 mg/mL

200 μL

113.48

108.22

10 mg/mL

200 μL

143.64

1000 μg/mL

200 μL

205.47

1000 μg/mL

75 μL

餅干

102.64

1000 μg/mL

100 μL

103.28

1000 μg/mL

37.5 μL

奶酪

88.04

1000 μg/mL

100 μL

82.78

1000 μg/mL

37.5 μL

奶茶

101.48

1000 μg/mL

100 μL

169.05

1000 μg/mL

37.5 μL

可樂

103.97

1000 μg/mL

200 μL

98.49

1000 μg/mL

75 μL

果凍

93.89

1000 μg/mL

100 μL

96.27

1000 μg/mL

37.5 μL

食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息:

貨號

名稱

規(guī)格

樣品前處理

68012

ProElut PLS

200 mg/6 mL, 30/pk

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12位

4803

1,3,6mL柱管通用連接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵,無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

30039

FitMax針頭式過濾器   Nylon

13 mm,0.22 μm   100/pk

30040

FitMax針頭式過濾器   Nylon

13 mm,0.45 μm   100/pk

標(biāo)準(zhǔn)品

53-69293-100G

三氯蔗糖[56038-13-2]

100 g

色譜柱及保護(hù)柱

99601

Diamonsil C18(2)

150 × 4.6 mm,5 μm

HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑

50101

乙腈  HPLC級

4 L

50102

甲醇  HPLC級

4 L

通用色譜產(chǎn)品

52401B

瓶架/藍(lán)色(現(xiàn)貨)

50孔

52401A

瓶架/白色(現(xiàn)貨)

50孔

1034

樣品瓶(棕色/螺紋)

2 mL, 100/pk

1035

樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

100/pk

H80465

HPLC 進(jìn)樣針

25 μL

紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*

 

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