胎牛血清是實驗室常用的天然培養基。它富含各種營養,但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細胞培養帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質檢中,也要進行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質。而胎牛血清的批號,則保證了每個批次的生產都是可以追溯的。
在美國,胎牛血清的病毒檢查遵循著9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53聯邦法令,并以獸藥委員會(CVMP)關于免疫性獸藥生產中應用牛血清的指南文件(EMEA/CVMP/743/00-Rev.2)、藥委員會(CPMP)關于生物藥生產中牛血清應用指南的文件(EMEA/CPMP/BWP/1793/02)為參考,并在美國藥典(USP)中有所描述。而我國在藥典中目前只有有關新生牛血清的質檢規定,還沒有胎牛血清的內容。
在USP提到病毒檢查中,建議使用兩種或兩種以上的細胞系作為檢測細胞,其中一種細胞系應為牛源。檢測時,添加15%的待測牛血清培養細胞至少21天,期間細胞至少傳代兩次。之后觀察是否存在病毒的擴增。
如用顯微鏡觀察是否存在細胞病變效應(例如由牛鼻支氣管炎病毒導致)、細胞染色和鏡下包涵體檢查、血吸附檢查((牛副流感3型病毒),并在此基礎上進行針對如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查:
Ø牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)
Ø牛細小病毒
Ø牛腺病毒
Ø牛蘭舌病毒
Ø牛呼吸道合胞病毒
Ø呼腸弧病毒
Ø狂犬病病毒
在其他牛血清的應用中,可能還需要檢測一些其他的病毒。如:
牛赤羽病,牛皰疹病毒1(BHV-1)、副流感-3病毒(PI-3)、牛白血病、牛輪狀病毒、牛圓環病毒、牛多瘤病毒、冠狀病毒、牛環曲病毒、牛腸道病毒、牛星狀病毒、口蹄疫病毒(FMDV)、牛瘟病毒。
總之,確定牛血清沒有病毒感染,無論對于細胞培養,還是疫苗生產,都具有非常重要的意義。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
慕尼黑上海分析生化展(analytica China 2024)
展會城市:上海市展會時間:2024-11-18