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【儀器網(wǎng) 解決方案】暗視野顯微鏡也叫超顯微鏡,常用來(lái)觀察未染色的透明樣品。
暗視野顯微鏡問(wèn)題及解決方法
1、問(wèn)題:
有足夠的照明,使標(biāo)本可見(jiàn),或標(biāo)本是可見(jiàn)的,但很微弱。
解決方案:燈電壓可以被設(shè)置得太低,或燈泡可能沒(méi)有足夠的強(qiáng)度照射試樣。將電壓升高到大約12伏(12伏,100瓦鎢鹵素?zé)襞荩┗蚋鼡Q光源,如果可能的話,與更大的強(qiáng)度。如果不解決這個(gè)問(wèn)題,檢查臺(tái)下冷凝器,以確保它正確的位置用適當(dāng)大小的視場(chǎng)光闌。此外,還要檢查顏色和/或中性密度濾光片,偏光板,相位差板,或任何其他組件,可能會(huì)降低光照強(qiáng)度的光路, 如果這個(gè)問(wèn)題發(fā)生的高數(shù)值孔徑反射式冷凝器,檢查做出一定冷凝器ding級(jí)鏡頭正確涂油的顯微鏡載片上的底部。如果浸沒(méi)接觸已被打破,重新申請(qǐng)了冷凝器的油和機(jī)架,直到頂端透鏡*浸在油中和底部的滑動(dòng)接觸。
2、問(wèn)題:
視場(chǎng)的中心降低光照強(qiáng)度,有一個(gè)暗點(diǎn),但在外圍的對(duì)象都亮起,顯示正常。
解決方案:臺(tái)下聚光器位置不正確或光站的目標(biāo)是錯(cuò)誤的大小。小心機(jī)架冷凝器向上和向下,同時(shí)在視場(chǎng)中觀察試樣。檢查做出一定的冷凝器孔徑和視場(chǎng)光闌設(shè)置敞開(kāi)位置。如果這并不影響照明,改變視場(chǎng)光闌尺寸使其稍大或稍小,然后重新檢查照明。 偶爾出現(xiàn)此問(wèn)題時(shí)使用過(guò)厚(大于標(biāo)準(zhǔn)一毫米)顯微鏡載玻片。使用千分尺或一組表卡尺來(lái)確定厚度滑動(dòng)和滑動(dòng)/蓋玻片組合。如果滑動(dòng)太厚,要么改變到正確的厚度的滑動(dòng)或檢查冷凝器,以確定它是否可以調(diào)整,以補(bǔ)償不同厚度的幻燈片。
3、問(wèn)題:
燈往往有一個(gè)很短的壽命,燈泡內(nèi)部有涂層的黑色蒸發(fā)的鎢燒結(jié)。
解決方案:長(zhǎng)時(shí)間在過(guò)高的電壓,這肯定會(huì)影響其壽命的燈泡已使用。更換燈泡減少燈電壓經(jīng)過(guò)觀察和/或試樣的顯微攝影。
4、問(wèn)題:
圖像有明場(chǎng)暗區(qū)的中心的帶或不帶外周。
解決方案:這個(gè)問(wèn)題是典型的臺(tái)下冷凝器時(shí),被錯(cuò)誤地集中或場(chǎng)站太小。恢復(fù)明場(chǎng),并重新建立科勒照明的條件下,再重復(fù)暗場(chǎng)的過(guò)程中,確保冷凝器集中。如果這沒(méi)有幫助,增加視場(chǎng)光闌的大小,直到建立適當(dāng)?shù)陌祱?chǎng)條件, 當(dāng)使用目標(biāo)具有太高的數(shù)值孔徑為暗場(chǎng)聚光,也可能出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。如果是在目標(biāo)內(nèi)部的可變光闌,降低光圈開(kāi)度的大小,以確定是否太多的斜光進(jìn)入物鏡鏡頭前面。此外,它可能有助于增加視場(chǎng)光闌的大小或改變反射的暗場(chǎng)聚光更高的數(shù)值孔徑。
5、問(wèn)題:
視場(chǎng)的外圍,只有一側(cè)是光明的。
解決方案:檢查物鏡轉(zhuǎn)換器,以確保正確地定位在顯微鏡的光軸的目標(biāo)。有一個(gè)制動(dòng)停止,正確定位目標(biāo)時(shí),應(yīng)該產(chǎn)生積極的“咔嚓”。問(wèn)題也可能發(fā)生,如果不能正確居中視場(chǎng)光闌。卸下目鏡和相望遠(yuǎn)鏡放置在眼管(或使用貝特朗鏡頭),然后使用定心螺絲正確對(duì)齊視場(chǎng)光闌。
6、問(wèn)題:
試樣圖像不清晰,缺乏足夠的對(duì)比度和細(xì)節(jié)。
解決方案:暗視野顯微鏡標(biāo)本可能不適合。許多染色標(biāo)本沒(méi)有足夠的散射光,暗場(chǎng)條件下能清楚成像。用試樣的厚度也可能是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)榉浅1〉臉悠吠怀上褚约芭c斜光線從暗視野冷凝器發(fā)射。這提高了標(biāo)本的對(duì)比,以確定是否變更明場(chǎng),相襯,DIC,霍夫曼調(diào)制對(duì)比度。
7、問(wèn)題:
明亮區(qū)域是重點(diǎn)妨礙觀看和/或暗場(chǎng)標(biāo)本的顯微攝影。
解決方案:這可能是由于灰塵,頭發(fā),纖維,和/或污物污染的光學(xué)表面冷凝器上方的某處。*清潔試樣滑動(dòng),光學(xué)級(jí)紙巾或棉球。有時(shí)候,這個(gè)問(wèn)題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。小心松開(kāi)其所在地物鏡轉(zhuǎn)換器的目標(biāo),慢慢轉(zhuǎn)動(dòng),同時(shí)通過(guò)目鏡觀察樣品。,如果梗阻一起旋轉(zhuǎn)的目標(biāo),那么它可能是由于前透鏡上的灰塵。取出的目標(biāo)和滋潤(rùn)鏡頭前輕輕呼氣,然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長(zhǎng)木桿。更換的目標(biāo)和檢查,以一定的梗阻已被*刪除。
8、問(wèn)題:
背景是均勻的照明,但不是*黑暗或會(huì)出現(xiàn)灰色的顏色。
解決方案:這個(gè)問(wèn)題通常發(fā)生在不透明場(chǎng)站太小,客觀。卸下目鏡和查看一個(gè)光路中的樣本的情況下的目標(biāo)使用一個(gè)相位望遠(yuǎn)鏡或伯特蘭透鏡的后焦面上。整個(gè)背部焦平面應(yīng)該是黑暗,沒(méi)有任何出現(xiàn)的四周邊緣,明亮的光線。如果在物鏡的后焦面的光的弧或圓的觀察,更改一個(gè)稍微大的視場(chǎng)光闌。此外,降低視場(chǎng)光闌的大小,將有助于抑制眩光和生產(chǎn)一個(gè)漆黑的背景(要小心,不要關(guān)閉此虹膜光圈太多)。
9、問(wèn)題:
燈泡冷凝器的圖像的視場(chǎng)部分地填充,模糊試樣的詳細(xì)信息。
解決方案:滑動(dòng)可能太薄或冷凝器可能被調(diào)得太高。厚度測(cè)量顯微鏡幻燈片,并進(jìn)行檢查,以確定油接觸不破。如果遇到困難,保持幻燈片油的底部,嘗試使用較厚的幻燈片。
10、問(wèn)題:
顏色顯示在背景中,或使背景光線不均與灰鑄鐵。
解決方案:這個(gè)問(wèn)題往往出現(xiàn)很厚,或當(dāng)太多的光散射污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲整個(gè)坐騎。關(guān)閉視場(chǎng)光闌試樣滑動(dòng)和旋轉(zhuǎn),以找到好的方向,然后確定問(wèn)題是否已得到糾正。試樣被重新安裝在一個(gè)較薄的安裝或安裝介質(zhì),可能需要進(jìn)行過(guò)濾。小心地用柔軟的鏡頭紙或棉簽清潔整個(gè)顯微鏡載玻片和蓋玻片。
11、問(wèn)題:
當(dāng)于水性坐騎,觀賞水生生物標(biāo)本漂在一個(gè)單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。
解決方案:對(duì)流,正在建立在蓋玻片的邊緣,由于緩慢蒸發(fā)。將胎圈凡士林或Cytoseal的蓋玻片周圍介質(zhì)的外周安裝到顯微鏡載片上,牢固地密封。商業(yè)產(chǎn)品可用,可以加入到水中,緩慢的移動(dòng)這些分鐘生物體,使它們更容易拍攝。
12、問(wèn)題:
當(dāng)觀看試樣通過(guò)10x物鏡的視場(chǎng)的中心,有一個(gè)長(zhǎng)圓形的光點(diǎn)。
解決方案:該燈冷凝器可能會(huì)錯(cuò)誤地聚焦或擴(kuò)散過(guò)濾器可能會(huì)丟失,導(dǎo)致圖像出現(xiàn)在視場(chǎng)中的燈絲。重新聚焦聚光,并在光路中有一個(gè)擴(kuò)散濾波。
13、問(wèn)題:
視場(chǎng)有亮點(diǎn),實(shí)現(xiàn)清晰對(duì)焦的標(biāo)本有問(wèn)題。
解決方案:可能被困在小氣泡與冷凝器之間的頂部和底部的顯微鏡載片上的油。卸下目鏡(或插入一個(gè)勃氏鏡)觀察的目標(biāo)的后焦平面上,將是可見(jiàn)的氣泡。為了彌補(bǔ),斷油接觸,并用棉簽除去殘留的氣泡。清理多余的油,然后從冷凝器的前鏡頭和顯微鏡幻燈片應(yīng)用干凈鏡頭滴油。如果問(wèn)題仍然存在,*清潔所有的光學(xué)表面,前重新申請(qǐng)機(jī)油。
14、問(wèn)題:
在高放大倍率,膠體粒子顯示不全的牛頓 環(huán)出現(xiàn)照明不均。
解決方案:冷凝器可能是偏離中心。切換到低功耗的目標(biāo)和中心冷凝器。請(qǐng)仔細(xì)檢查,以確定是否在更高的功率目標(biāo)具有不同的中心,如果是的話,中心的目標(biāo),以顯微鏡光軸。
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慕尼黑上海分析生化展(analytica China 2024)
展會(huì)城市:上海市展會(huì)時(shí)間:2024-11-18