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中文全稱:小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse anti-Monocyte antibody,AMA ELISA kit
供應商:上海古朵生物
產品規格:48T/96T
產地:國產/進口
樣本:血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿及相關液體樣等
標記物:人,大鼠,小鼠,豚鼠,豬,牛,羊等種屬
應用:科研實驗
檢測方法:雙抗體夾心法,間接法,競爭法等
檢測限:人,大鼠,小鼠,豚鼠,豬,牛,羊等種屬
小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒應用范圍可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
樣本處理方法
植物樣本:
1,樣本在保持鮮重的同時,重量不能低于50mg
2,組織勻漿比例按照10%進行,相當于1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液要求用PBS,濃度是0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4我們并不要求沒個樣本的重量必須保持1g整數,只要大于50mg即可,相對應勻漿液按照1:9的關系隨之改變即可
3,剪碎葉片組織放入碾缽,然后液氮碾磨成粉末,加入換算后的勻漿液的量
4,離心取上清
備注:換算結果是乘以加入勻漿液的量,除以稱取的重量,這個終換算比例相當于乘以9g除以1ml,如果檢測細胞內部,需要加一個超聲破碎過程!
組織勻漿三原則
剪碎葉片組織放入碾缽,然后液氮碾磨成粉末,加入換算后的均漿液的量。這個不會處理的話,可以直接郵寄葉片我們處理。
小鼠抗單核細胞抗體(AMA)elisa檢測試劑盒樣本需求量:
植物是組織樣本,固體 要求的重量是大于50mg。血清血漿50微升以上,一個樣本。對大鼠小鼠液體樣本需求可以適當放寬,但必須大于10微升以上
組織勻漿原則:
1,對于樣本要求保持鮮重
2,稱取樣本中的重量不小于50mg,一般以1g為基準,但不嚴格要求固定樣本每個重量必須達到相同的水平。
3,勻漿的比例選取10%,相當于1g組織加9ml的勻漿液來進行勻漿。
4,勻漿液選取PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)
5,勻漿過程選用組織勻漿器,冰浴上勻漿。(或者進行液氮碾磨)
6,離心取上清,離心轉速選用5000轉每分,時間是15分鐘。取上清液待檢!
血清血漿的收集
首先要求確定樣本收集類型,血清還是血漿?一般情況收集血清為好,血清收集2種方法,如下:
1.促凝管(臨床上用橘紅色管頭)待分層后取上清液保存
2.自然凝固,取普通生化試管,自然凝固30分鐘以上,然后離心取上清,離心轉速為2000轉每分,時間15分鐘。
全血收集完成后進了分離出血紅細胞,避免導致溶血對實驗產生干擾
其次涉及樣本保存,因為不確定老師樣本取樣周期和實驗周期到底有多長,這個過程涉及以下問題。
1.關于樣本檢測問題,如果樣本取樣周期過程,涉及到分不同時間段來檢測,那么試劑盒的批次也會出現差異,會有一定的變異系數。這個過程有2個建議,第1,可以收集一定數量(滿足一個試劑盒的量或者幾個試劑盒的量)來進行一次實驗。避免樣本長時間保存(樣本保存時間越長,蛋白降解風險越大),但缺點是會用到不同批次試劑盒,影響批間差。第二個就是把樣本全部收集好了后,再一次進行實驗,用同一批次試劑盒。這個可以減少批間差,但樣本不同時間取樣會導致前后樣本數值之間會存在一定的差異性。這個還是要根據實際取樣周期和取樣量來做決定。
2.如果取樣周期比較久,而且每次樣本不是很多,每天或者短時間都有樣本出來,這個情況樣本涉及到保存。保存條件是1周內實驗的,2-8℃,一周以上一個月以內實驗,-20℃保存,一月以上-80℃保存。
血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
批號:現制備
有效期:6個月
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