被猛男CAO烂的小男生GV,古代妓院做爰片120分钟,电影在线观看,国产免费av片在线无码免费看

準備物品：PBS、吸管、細胞凍存液、恒溫培養箱 細胞凍存液：DMSO：FBS=1:4 步驟： 

1.吸出培養基，用PBS清洗兩遍，應*清除培養基，否則會影響胰酶的消化作用； 

2.加入2-3ml胰酶（75cm規格培養瓶）至培養瓶中，放入37℃恒溫培養箱中，消化2-3min，顯微鏡下觀察細胞形態由梭形變為圓形，立即加入3-6ml*培養基終止消化； 

3.用吸管輕柔吹打內壁數次幫助細胞脫落，將細胞懸液收集至15ml離心管中，1000rpm離心6-8min， 

4.沿細胞沉淀方向緩慢傾倒液體，加入500μl的培養基重懸，用加樣槍將細胞懸液移至凍存管內； 

5.在凍存管內加入等量凍存液，為避免DMSO對細胞的損傷過大，凍存液應一滴一滴的加入，后混勻。 

6.直接裝入凍存盒內，放入-80℃冰箱 ；