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實(shí)驗(yàn)室*病毒流式標(biāo)本處理的4大注意事項(xiàng)!

閱讀:4202      發(fā)布時(shí)間:2020-2-28
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  在進(jìn)入正題之前,杰懋小編有話說:
 
  自2019年12月以來,新型冠性病毒已經(jīng)*施虐了我們2個(gè)月的時(shí)間,這場(chǎng)無聲的硝煙比我們想象中的要來得激烈,這場(chǎng)戰(zhàn)爭(zhēng)比我們想象中要更持久,經(jīng)過千千萬萬位白衣天使的努力和付出,經(jīng)過廣大民眾以及社工人員的堅(jiān)持和努力,疫情總算在一點(diǎn)一點(diǎn)得到控制。
 
  然而,在近兩天,網(wǎng)上突然鋪天蓋地般地出現(xiàn)了人群開始松懈、摘掉口罩聚集的消息,這是一件多么可怕的事情!截止2020年2月23號(hào),鐘南山戰(zhàn)士稱當(dāng)前疫情仍然嚴(yán)峻,目前已達(dá)到吃勁的時(shí)候,所以,希望廣大民眾在安全響應(yīng)解除之前都別掉以輕心,否則白衣天使的夜以繼日的拼命就白費(fèi)了,之前足不出戶的堅(jiān)持都白費(fèi)了!
 
  國(guó)家衛(wèi)健委批準(zhǔn),1月25日發(fā)布的《北京協(xié)和醫(yī)院關(guān)于“新型冠狀病毒感染的肺炎”診療建議方案(V2.0)》第二條“2019-nCoV病人的診療-診斷標(biāo)準(zhǔn)中提到:對(duì)于急性發(fā)熱對(duì)于急性發(fā)熱(72h內(nèi),體溫大于37.5度)且肺部影像學(xué)正常者,若外周血淋巴細(xì)胞覺對(duì)值小于0.8×109/L,或出現(xiàn)CD4及CD8 T細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯下降者,即使核酸檢測(cè)未呈現(xiàn)陽性,均應(yīng)居家隔離密切觀察。病人常規(guī)檢查中提到:1、篩查病例,就診當(dāng)日可酌情查炎癥因子(IL-6,IL-10,TNF-α)、TB亞群11項(xiàng).2、確診病人序貫檢查,第5-7天若有條件可復(fù)查TB淋巴細(xì)胞亞群11項(xiàng)。
 
  因?yàn)槊庖呤艿脚R床的重視,許多*病人的定點(diǎn)醫(yī)院都開展了流式的檢測(cè)。對(duì)于流式工作的老師,除了結(jié)果的準(zhǔn)確及解讀以外,也需要關(guān)注生物安全的防護(hù)。
 
  下面就整理的流式樣本處理過程中一些注意事項(xiàng),獻(xiàn)給我們的流式工作者們。
 
  01樣本加樣:
 
  建議在生物安全柜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,如有液體濺出,用浸濕75%酒精的紗布覆蓋后擦拭。個(gè)人按照3級(jí)生物安全進(jìn)行防護(hù)。
 
  2019-nCov 生物安全防護(hù)措施:
 
  ? 一級(jí)生物安全防護(hù):醫(yī)用外科口罩、乳膠手套、工作服、醫(yī)用防護(hù)帽,加手衛(wèi)生
 
  ? 二級(jí)生物安全防護(hù):醫(yī)用防護(hù)口罩或N95口罩、乳膠手套、工作服、外隔離衣、醫(yī)用防護(hù)帽,加手衛(wèi)生,酌情可加護(hù)目鏡。
 
  ? 三級(jí)生物安全防護(hù):醫(yī)用防護(hù)口罩或N95、雙層乳膠手套、面屏、護(hù)目鏡、工作服外防護(hù)服、雙層醫(yī)用防護(hù)帽,加手衛(wèi)生、必要時(shí)雙層口罩(外醫(yī)用防護(hù)口罩,內(nèi)N95)。
 
  02溶血及固定:
 
  根據(jù)衛(wèi)生部2011年發(fā)布的《流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群指南》,盡量使用含固定劑的溶血素可以達(dá)到滅活病毒的作用。
 
  如使用其他不帶固定劑成分的溶血素如氯化銨,也可以配制0.1%-2.0%的多聚甲醛或甲醛,或者稀釋好的細(xì)胞保存液在溶血時(shí)一起加入,并且放置30min,可以達(dá)到滅活病毒的作用。
 
  03混勻、離心等步驟防護(hù):
 
  滅活前的樣品處理步驟,須嚴(yán)格按照三級(jí)防護(hù),謹(jǐn)防氣溶膠污染,例如:
 
  ? 使用帶生物安全密封蓋或密封杯的離心機(jī)進(jìn)行離心(如德國(guó)NACHT納赫特高速冷凍離心機(jī)NACHTC-30R配套的透明密封杯系列),樣品管/流式管優(yōu)選帶密封蓋離心,不使用自動(dòng)脫帽離心功能;
 
  ? 即使室溫離心,也選用密封更良好的制冷型離心機(jī)(如德國(guó)NACHT納赫特NACHTC-30R),并置于負(fù)壓抽風(fēng)區(qū)域;
 
  ? 離心后靜置10-30分鐘再開蓋,仔細(xì)觀察樣品無泄漏后,再把透明密封杯移至生物安全柜再開蓋取樣。
 
  04儀器的清洗及維護(hù):
 
  如有樣本的灑溢,請(qǐng)用浸濕75%酒精的紗布覆蓋30min后擦拭,包括樣本進(jìn)樣針。
 
  流式細(xì)胞儀的廢液桶中需要裝有占其體積 1/10的0.71mol/L次氯酸鈉 (未稀 釋的家用漂白劑)。 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備應(yīng)該用具有滅活傳染源作用的溶液或新配制的 10%家用漂白劑消毒 ,尤其在設(shè)備維修和保養(yǎng)前給予嚴(yán)格消毒。
 
  在這緊要的關(guān)頭,奮戰(zhàn)在一線的戰(zhàn)士希望你們平安健康,還未可出門的朋友希望你們繼續(xù)堅(jiān)持一下,已經(jīng)復(fù)工的小伙伴們希望你們千萬注意防護(hù)和安全,待到疫情結(jié)束,我們?cè)偃ノ錆h看櫻花,再看祖國(guó)這大好山河的春意盎然。
 
  參考資料:
 
  1. 《北京協(xié)和醫(yī)院關(guān)于“新型冠狀病毒感染的肺炎”診療建議方案(V2.0)》
 
  2. 2019新型冠狀病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的生物安全指南(試行diyi版)--中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)
 
  3. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群指南--2011版衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

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