大鼠IFN-γelisa檢測試劑盒采用體外酶聯免疫吸附測定法，定量測定大鼠血清（正常血清和血漿中的大鼠IFN-γ濃度低，在該測定中可能無法檢測到），血漿和細胞培養上清液中的IFN-γ的含量。

大鼠IFN-γ檢測試劑盒（ELISA）

ELISA操作結果判斷過程常見問題及解答：

1） 標準曲線線性差，或者沒有運行標準曲線；質控不在控。

2） 出現假陰性結果或假陽性結果

3） 測定結果的重復性差

4） 全部板孔不顯色或全部顯色，無法判斷結果

解決方法：

1.加樣時，不同濃度標準品使用不同槍頭。標準品稀釋過程要保證量和均勻性。標準品可做復孔測定，明顯偏離的標準品可舍去。每次測試，都要運行標準品和質控品，以保證結果的準確。質控品不在質控單檢測范圍內時，說明實驗無效，不能報告實驗結果，需要重新檢測。

2.出現假陰性樣本可能是孵育溫度和時間不足，酶標記物加樣量不足，顯色時間短等原因，讀數時終止時間過長等，應嚴格按照說明書操作要求進行；

通用名稱：大鼠IFN-γ檢測試劑盒（ELISA法）
英文名稱：RayBio® Rat IFN-gamma ELISA Kit
產品貨號：ELR-IFN-γ
產品規格：96T
檢測樣本：血清、血漿、細胞上清液
公司品牌：美國RayBio
儲存條件：-20℃
檢測方法：ELISA方法
預期用途：定量測定大鼠血清、血漿和細胞培養上清液中的IFN-γ的含量
參考價格：詢價
供應商家：深圳市科潤達生物工程有限公司 

大鼠IFN-γ檢測試劑盒預期用途

RayBio®大鼠IFN-γ ELISA試劑盒采用體外酶聯免疫吸附測定法，定量測定大鼠血清（正常血清和血漿中的大鼠IFN-γ濃度低，在該測定中可能無法檢測到），血漿和細胞培養上清液中的IFN-γ的含量。

大鼠IFN-γelisa檢測試劑盒檢測原理

大鼠IFN-γ檢測試劑盒使用包被有IFN-γ特異性抗體的96孔酶標板，標準品和樣品被加入到孔中，樣品中存在的IFN-γ通過固相的抗體與孔結合。洗滌后加入*化的抗大鼠IFN-γ抗體。 洗去未結合的*化抗體后，將HRP-標記的*加入到到孔中。 再次洗滌板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物顯色與所結合的IFN-γ量成比例。 加入終止液顏色從藍色變為黃色，并且在450nm處測量顏色的吸光度值。

大鼠IFN-γelisa檢測試劑盒組成成分
●IFN-γ酶標板（項目A）——12*8=96孔，包被有抗人IFN-γ抗體——4℃ 1個月
●濃縮洗滌液（20x）（項目B）——20x濃縮溶液 25ml ——4℃ 1個月
●標準蛋白（項目C）——2瓶人類IFN-γ。1個小瓶就夠配制每個一式兩份的標準品。——-80℃1個月
●檢測抗體IFN-γ（項目F）——2瓶*化的抗大鼠IFN-γ。
●每個小瓶足以測定微板的一半。——4℃ 5天
●濃縮HRP-鏈霉親和素（項目G）——200μl 200X濃縮HRP綴合鏈霉親和素——不能保存和重新使用
●一步法TMB底物（項目H）——TMB溶液12ml ——N/A
●終止液（項目I）——8ml 0.2M硫酸——N/A
●測定稀釋劑A（項目D）——30ml稀釋緩沖液，0.09％Sodium azide防腐劑。——N/A
●測定稀釋劑B（項目E）——15ml 5X濃縮液——4℃ 1個月

大鼠IFN-γ檢測試劑盒檢測步驟

●使用前將所有試劑和樣品置于室溫（18 - 25ºC）。建議所有標準和樣品至少重復一次。
●根據您的實驗標記可拆卸的8孔條。
●分別加入樣品和每個標準品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當的板孔中。蓋上蓋子，室溫溫和振蕩孵育2.5小時
●棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動洗板機洗板，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個步驟中去除液體對于良好的性能是至關重要的。洗完后，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。
●每孔加入100μl1X制備的*化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時。
●棄去溶液。重復洗滌，如步驟4。
●加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）。在室溫下溫和搖動孵育45分鐘。
●棄去溶液。 重復洗滌，如步驟4。
●向每個孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項目H）。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
●向每個孔中加入50μl終止液（項目I）。 立即讀取450 nm處吸光度值。

大鼠IFN-γ檢測所需材料（試劑盒內不提供）
●能夠測量450 nm處吸光度的酶標儀。
●提供2μl至1 ml體積的精密移液管。
●可調1-25毫升移液器用于試劑制備。
●100毫升和1升刻度量筒。
● 吸水紙。
● 蒸餾水或去離子水。
●雙對數做圖紙或計算機和軟件進行ELISA數據分析。
●準備標準品或樣品稀釋液的管子。

大鼠IFN-γ檢測試劑盒存儲

大鼠IFN-γ檢測試劑盒可在-20°C下保存，從裝運之日起存放可長達1年。 避免反復凍融循環。 試劑盒可以在4℃下儲存長達6個月。 對于更長時間儲存時，建議儲存在-80°C。 該試劑盒組分見下表

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