Filmplate系列微生物檢驗測試片主要應用于食品、飲料及相關行業的微生物檢測,在全國食品檢測領域均有廣泛的使用。2007年,微生物檢驗測試片被正式列為中國出入境檢驗檢疫行業標準,該方法正逐漸被越來越多的食品生產加工企業及各類檢測機構所認可。
產品簡介:
Filmplate系列微生物檢驗測試片主要應用于食品、飲料及相關行業的微生物檢測,在全國食品檢測領域均有廣泛的使用。2007年,微生物檢驗測試片被正式列為中國出入境檢驗檢疫行業標準,該方法正逐漸被越來越多的食品生產加工企業及各類檢測機構所認可。
Filmplate測試片方法與傳統培養皿培養方法相比:
1. 更簡單高效:顯著縮短測試時間,操作程序更加簡便,不需要很高的操作技巧,有助于提高微生物實驗質量和提高實驗室效率。
2. 更節省成本:免除了培養基制備環節,也就因此省去了培養基配制和滅菌、培養皿清洗和滅菌等大量輔助性工作和因此帶來的不必要的實驗成本。
附:Filmplate菌落總數測試片產品說明。
1、原理及適用范圍
菌落總數是指樣品經過處理,在一定條件下培養后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數,是的微生物檢測項目。
Filmplate菌落總數測試片是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC);經加樣、培養后,菌落在測試片上顯現出紅色菌斑,通過計數報告結果。這樣無需培養基制備和滅菌過程,顯著縮短計數時間和增強計數效果。
本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數的測定,也可用于檢測食品加工容器、操作臺和其他設備表面的菌落總數。執行標準:食品安全國家標準 食品微生物學檢驗菌落總數測定(GB/T 4789.2-2010)。產品亦可用于生活飲用水和水源水的微生物快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數測試片(BB202)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。一般食品培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h;水產品培養溫度為30℃±1℃,培養48h。
3、結果判讀
細菌在測試片上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數適中(30~300個)的測試片進行計數,乘以稀釋倍數后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細菌菌落總數。
4、計數原則及報告方式
4.1、若只有一個稀釋度紙片上的菌落數在適宜計數范圍內,計算兩個紙片菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數,作為每毫升(或克)樣品中菌落總數結果。
4.2、若有兩個連續稀釋度的紙片菌落數在適宜計數范圍內時,按式(1)計算:
(圖11)
式中:
N——樣品中菌落數;
∑C——測試片上(含適宜范圍菌落數的測試片)菌落數之和;
n1——*個適宜稀釋度測試片數;
n2——第二個適宜稀釋度測試片數;
d——稀釋因子(*稀釋度)。
示例(圖12):
上述數據經“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
4.3、若所有的稀釋度菌落總數均大于300CFU,則對稀釋度*的測試片進行計數,其他測試片可記錄為多不可計,結果按平均菌落數乘以*稀釋倍數計算。
4.4、若所有的稀釋度菌落總數均小于30CFU,則應按稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
4.5、若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數計算。
4.6、若所有稀釋度的平均菌落數均不在30CFU~300CFU之間,其中一部分小于30CFU或大于300CFU,則以30CFU或300CFU的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
4.7、菌落總數的報告
4.7.1、菌落總數在100CFU以內時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數字報告。
4.7.2、大于或等于100CFU時,第三位數字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數字,后面的0代替位數,也可用10的指數形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數字。
4.7.3、若測試片上一片紅色無法計數時,則報告多不可計。
4.7.4、若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結果無效。
4.7.5、稱重取樣以CFU/g為單位報告,體積取樣以CFU/mL為單位報告。
5、表面取樣方法
加1mL滅菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)在測試片上,至少靜置10S,使培養基凝固;提起上層膜,使*濾紙部分貼到待測物表面,用手在外側輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養箱內培養。
6、附加說明
6.1、菌落總數測試片檢測結果與傳統平板計數瓊脂平板法符合率可達80%以上,山東省疾病預防控制中心進行的驗證試驗表明,24h計數測試片上菌落數為平板菌落數的87%。
6.2、磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0g的溶于500mL蒸餾水中,用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調節pH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15分鐘,或者放入消毒碗柜中消毒。
6.3、生理鹽水的配制與滅菌:取8.5g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000mL蒸餾水或純凈水中,先煮開后進行分裝,取9mL加入到10mL潔凈試管中,蓋上硅橡膠塞或棉紗塞,放入紅外線消毒柜中消毒。
7、保存條件
本產品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水,*在拆封前將整包回溫至室溫。
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