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　　細胞名稱3T6-Swissalbino（小鼠胚胎成纖維細胞）

　　種屬小鼠

　　年齡（性別）胚胎

　　組織來源胚胎；成纖維細胞生長特性貼壁細胞形態成纖維細胞樣背景描述3T6-Swissalbino細胞是于1963年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立的，3T6-Swissalbino細胞能分泌膠原質和透明質酸。檢測表明，3T6-Swissalbino細胞肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。

　　生長培養基DMEM高糖＋10%FBS＋1%P/S

　　培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

　　細胞收到后處理：

　　細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的最，好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液收集至離心管中，加入6ml*培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的*培養基，另外一瓶用自己配的*培養基）

　　細胞培養步驟：

　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

　　3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

　　4.按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培養液的新皿中或者瓶中。