雙組分TMB顯色溶液
雙組分TMB顯色溶液產(chǎn)品簡介:
目前酶免疫分析(EIA)技術(shù),已被廣泛應(yīng)用于抗原,半抗原或抗體的定量或定性檢測分析。辣根過氧化物酶(HRP)及其偶聯(lián)物是酶聯(lián)免疫分析技術(shù)中常用的一種酶,由于3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)在HRP的顯色反應(yīng)體系中,比其它色原具有更高的靈敏度且無致癌性而被廣泛應(yīng)用。TMB主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),免疫斑點(diǎn)雜交或者免疫組化以及氯和過氧化氫的檢測分析。為了滿足不同的試劑盒產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)以及科研需求,本公司專門研制了針對(duì)不同類型的基于HRP的免疫分析用TMB顯色液。
外觀與結(jié)構(gòu):顯色液A應(yīng)為無色或淡黃色透明液體,顯色液B應(yīng)為無色透明液體。均無沉淀、顆粒及絮狀物。
用于酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中的顯色階段:可于樣本反應(yīng),生成深藍(lán)色產(chǎn)物。
使用方法:
加液:待樣品孔中加完HRP結(jié)合物并孵育一定時(shí)間后,用適當(dāng)洗滌液洗板3-5次,每孔加底物顯色液A、顯色液B各50ul(A、B液先混合再加入孔中),輕輕混勻,根據(jù)個(gè)人實(shí)驗(yàn)需要,在室溫(15-25℃)或37℃下避光溫育10-30分鐘或更長時(shí)間,直至顯色至預(yù)期深淺。
終止:每孔加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應(yīng),孔中反應(yīng)液由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
讀數(shù):終止反應(yīng)后15分鐘內(nèi)在450nm處測定各孔溶液的吸光值。
對(duì)照:空白對(duì)照不加HRP標(biāo)記的抗體/抗原和陰性對(duì)照結(jié)果應(yīng)無色。陽性對(duì)照及加HRP標(biāo)記的抗體/抗原產(chǎn)生深藍(lán)色產(chǎn)物。
注意:如果出現(xiàn)高的反應(yīng)背景或沉淀,表明TMB底物反應(yīng)過于強(qiáng)烈。為了避免產(chǎn)生沉淀,可在終止后馬上讀數(shù);或者進(jìn)一步稀釋一抗和/或HRP結(jié)合物。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)該專一,避免交叉污染。
2、TMB對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作