現代化學的一大科研難題是如何實現在納米尺度下對材料進行無損化學成分鑒定。現有的一些高分辨成像技術,如電鏡或掃描探針顯微鏡等,在一定程度上可以有限的解決這一問題,但是這些技術本身的化學敏感度太低,已經無法滿足現代化學納米分析的要求。而另一方面,紅外光譜具有很高的化學敏感度,但是其空間分辨率卻由于受到二分之一波長的衍射極限限制,只能達到微米級別,因此也無法進行納米級別的化學鑒定。 德國neaspec公司利用其*的散射型近場光學技術發展出來的nano-FTIR納米傅里葉紅外光譜,使得納米尺度化學鑒定和成像成為可能。這一技術綜合了原子力顯微鏡的高空間分辨率和傅里葉紅外光譜的高化學敏感度,因此可以在納米尺度下實現對幾乎所有材料的化學分辨。因而,現代化學分析的納米新時代從此開始。 neaspec公司的散射型近場技術通過干涉性探測針尖掃描樣品表面時的反向散射光,同時得到近場信號的光強和相位信號。當使用寬波紅外激光照射AFM針尖時,即可獲得針尖下方10nm區域內的紅外光譜,即nano-FTIR.
在不使用任何模型矯正的條件下,nano-FTIR傅里葉紅外光譜儀獲得的近場吸收光譜所體現的分子指紋特征與使用傳統FTIR光譜儀獲得的分子指紋特征吻合度*(如下圖),這在基礎研究和實際應用方面都具有重要意義,因為研究者可以將nano-FTIR光譜與已經廣泛建立的傳統FTIR光譜數據庫中的數據進行對比,從而實現快速準確的進行納米尺度下的材料化學分析。對化學成分的高敏感度與超高的空間分辨率的結合,使得nano-FTIR成為納米分析的*工具。
近年來,流感病毒已被用作包膜病毒的原型來研究病毒進入宿主細胞的過程。IFV中血凝素(HA)是嵌入IFV包膜的主要表面糖蛋白。 HA負責IFV與宿主細胞受體的連接,并在病毒進入過程中參與介導膜融合。眾多研究已經為靶標和病毒膜之間的融合機制建立了一個*的模型。該模型認為只有在靶標和病毒膜發生膜融合時才可形成孔從而介導病毒-細胞膜滲透行為。然而,其他報道也觀察到在融合發生之前靶標和病毒膜的破裂。此外,關于腺病毒蛋白與宿主細胞的研究顯示,宿主細胞膜可能在沒有膜融合的情況下被破壞而進入病毒。另一方面,病毒包膜和靶宿主細胞膜具有不同的化學組成或結構,各個膜中形成孔的要求不同,因此靶宿主或病毒膜破裂也可能獨立地被誘導。
綜上所述,關于病毒-細胞膜滲透行為的機理還存在一定的爭議,明確單個病毒與宿主細胞的復雜融合機制,可為設計抗病毒化合物提供有利信息。然而,常規的病毒整體融合測定法是對膜融合事件的集體響應,不能對細微、尤其是在納米尺度復雜的融合細節進行直接和定量的研究,因此無法直接量化一些可以通過研究單個病毒、納米尺度表面糖蛋白和脂包膜來獲得的融合細節。例如,病毒感染過程在分子水平上引起的病毒膜和宿主細胞膜的化學和結構組成改變,可以通過分子特異性紅外光譜技術來探測。然而,單個病毒、表面糖蛋白和脂包膜尺寸小于紅外光的衍射極限,限制了單個病毒的紅外光譜研究。因此,找到一個既可以提供納米高空間分辨率,還能探測機械、化學特性(分子特異紅外光譜)和環境影響的工具,使其可在單病毒水平上研究病毒膜融合過程是十分重要的。
來自美國喬治亞大學和喬治亞州立大學的Sampath Gamage和Yohannes Abate等研究者采用 nano-FTIR & neaSNOM研究了單個原型包膜流感病毒X31在不同pH值環境中發生的結構變化。同時,還定量評估了在環境pH值變化期間,抗病毒化合物(化合物136)阻止病毒膜破壞的有效性,提供了一種抑制病毒進入細胞的新機制。
詳細信息閱讀:應用專題|納米分辨傅里葉紅外光譜與成像技術(nano-FTIR & neaSNOM)助力科學家實現單病毒膜滲透行為研究進展
參考文獻:[1] Sampath Gamage, Yohannes Abate et al., Probing structural changes in single enveloped virus particles using nano-infrared spectroscopic imaging, PLOS ONE.
nano-FTIR傅里葉紅外光譜儀可以應用到對納米尺度樣品污染物的化學鑒定上。下圖顯示的Si表面覆蓋PMMA薄膜的橫截面AFM成像圖,其中AFM相位圖顯示在Si片和PMMA薄膜的界面存在一個100nm尺寸的污染物,但是其化學成分無法從該圖像中判斷。而使用nano-FTIR在污染物中心獲得的紅外光譜清晰的揭示出了污染物的化學成分。通過對nano-FTIR獲得的吸收譜線與標準FTIR數據庫中譜線進行比對,可以確定污染物為PDMS顆粒。
AFM表面形貌圖像 (左), 在Si片基體(暗色區域B)與PMMA薄膜(A)之間可以觀察到一個小的污染物。機械相位圖像中(中),對比度變化證明該污染物的是有別于基體和薄膜的其他物質。將點A和B的nano-FTIR 吸收光譜(右),與標準紅外光譜數據庫對比, 獲得各部分物質的化學成分信息. 每條譜線的采集時間為7min, 光譜分辨率為13 cm-1. ("Nano-FTIR absorption spectroscopy of molecular fingerprints at 20 nm spatial resolution.,”,F. Huth, A. Govyadinov, S. Amarie, W. Nuansing, F. Keilmann, R. Hillenbrand,)Nanoletters 12, p. 3973 (2012))
范得瓦爾斯晶體是由層與層之間微弱的范德華力的相互作用構成的薄層晶體,類似石墨塊中的石墨烯單原子層。這類晶體具有超導、鐵磁性、發光性等等特殊性質。
S.Dai等人利用Neaspec公司的納米傅里葉紅外光譜系統(Nano-FTIR)研究了不同厚度的薄 層氮化硼晶體中的聲子極化激元(一種光子與光學聲子的耦合作用)。結果表明,極化波的傳播現象存在于氮化硼晶體表面,而且極化波的波長隨著氮化硼晶體的厚度變化而變化。分析結果還可以得到表面聲子極化激元色散特性關系。這些實驗數據可以很好的與理論模型相吻合。與石墨烯相比,氮化硼晶體的損失因子要小很多,所以氮化硼晶體中表面聲子波傳播距離相對較大。
參考文獻:S.Dai; et.al. Tunable Phonon Polaritons in Atomically Thin van der Waals Crystals of Boron Nitride. Science 2014, 343, 1125-1129.
I. T.Lucas等人利用Neaspec公司的納米傅里葉變換紅外光譜技術(nano-FTIR)對磷酸鐵鋰在鋰電池的充放電過程中的相位分布進行了具體的研究。根據對不同充放電階段的正極材料紅外吸收光譜的研究,實驗結果直接證明,充放電的中間過程部分脫鋰的正極材料同時存在磷酸鐵鋰與磷酸鐵兩種相位。通過建立三維層析成像的模型建立與分析,由磷酸鐵組成的外殼包圍由磷酸鐵鋰組成的核心的“外殼-核心結構”模型解釋該實驗所得結果。分析表明在脫鋰的過程中,核心部分的磷酸鐵鋰慢慢的變小直至終消失。
參考文獻:I. T. Lucas ; et. al. IR Near-Field Spectroscopy and Imaging of Single LixFePO4 Microcrystals. Nano Letters 2015, 15, 1-7.
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